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Thermo Scientific T4 DNA 连接酶催化双螺旋 DNA 或 RNA 中并排的 5-磷酸基和 3-羟基端之间磷酸二酯键的形成。该酶可以修复双螺旋 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂合体中的单链缺口。其还可以将 DNA 片段与黏性末端或平末端结合，但对单链核酸无活性。

T4 DNA 连接酶需要 ATP 作为辅因子。

产品优势

● 在 Themo Scientific 限制性内切酶、PCR 和 RT 缓冲液（补充 ATP 时）中均有活性
● 快速—在室温下于 10 分钟内完成黏性末端连接
● 随 PEG 溶液提供，用于高效平末端连接

应用

● 克隆限制性内切酶生成的 DNA 片段
●克隆 PCR 产物
● 将双链寡核苷酸连接子或接头与 DNA 相连
● 定点突变
● 扩增片段长度多态性 (AFLP)
● 连接酶介导的 RNA 检测（参见参考 3）
● 双螺旋 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交体中的缺口修复
● 线性 DNA 的自环化。

包括

● T4 DNA 连接酶
● 10X T4 DNA 连接酶缓冲液
● 50% PEG 溶液

备注

● T4 DNA 连接酶与 DNA 的结合可能导致琼脂糖凝胶中发生条带位移。为避免发生这种情况，可使用 6X DNA 上样染料 & SDS 溶液在 70°C 下孵育样品 5 分钟或在 65°C 下孵育 10 分钟，在冰上冷却后进行电泳。
●在转化过程中，连接反应混合物的体积不得超过感受态细胞体积的 10%。
●在电转化之前，使用离心柱或氯仿提取去除连接混合物中的 T4 DNA 连接酶。提取得到的 DNA 可以使用乙醇进一步沉淀。