3118acm云顶集团(中国区)官方网站-首页

Thermo Scientific FastAP 热敏感性碱性磷酸酶可催化 DNA、RNA 和核苷酸释放 5'- 和 3'-磷酸基团。该酶还可去除蛋白中的磷酸基。

FastAP 是一种新型碱性磷酸酶，在所有 Thermo Scientific 限制性内切酶缓冲液和 PCR 缓冲液中均有活性。其可在 37°C 下于 10 分钟内对所有类型的 DNA 末端（平末端、5'-和 3'-突出端）进行去磷酸化。该酶在 75°C 下于 5 分钟内失活（参见支持性数据中的图 1）。因此，在连接前不需要去除碱性磷酸酶。

产品优势

● 重组酶
● 快速去磷酸化—37°C 下 10 分钟
● 快速、完全失活—75°C 下 5 分钟
● 载体 DNA 的同时酶切和去磷酸化
● 在限制性内切酶和 PCR 缓冲液中有 100% 活性
● PCR 纯化结合 Exo I
● 蛋白去磷酸化

一个方案适用于所有类型的 DNA 末端：
● 5'-突出端
● 3'-突出端
● 平末端
● 单核苷酸

应用

● 克隆载体 DNA 的去磷酸化，以防止连接期间的重新环化
● 载体 DNA 的同时酶切和去磷酸化
● PCR 产物纯化：PCR 产物测序前的核苷酸降解
● T4 多聚核苷酸激酶标记前核酸 '-末端的去磷酸化5
● 必须进行 DNA 和 RNA 底物去磷酸化的其他应用
● 蛋白去磷酸化

注意

● FastAP 热敏感性碱性磷酸酶与 DNA 的结合可能导致琼脂糖凝胶中发生条带位移。为避免发生这种情况，可使用 6X DNA 上样染料 & SDS 溶液在 65°C 下孵育样品 10 分钟，在冰上冷却后进行电泳。
● FastAP 热敏感性碱性磷酸酶在所有限制性酶缓冲液中都有活性，可直接加入到酶切的 DNA 中。去磷酸化处理前无需热失活限制性酶。